Este Ferizante de Atami оценивается как бактерии и микроорганизмы, содержащиеся в организме, для ревитализантов

Идеально для выращивания в почве, пригодного для выращивания растений. Этот продукт представляет собой альтернативное содержание нитрогенов для всех растений и растений, которые содержат растительные ткани, живые и интенсивные.

¿Cuáles son los beneficios de usar 1 Component Oil Grow?

• Alimento con alto contenido de micro y macronutrientes que allowirá a tus plantas desarrollarse óptimamente.
• Proporciona una base de нутриенты Complete que maximiza el rendimiento de tus plantas de cannabis.
• Идеально для конопли, которая используется для презентаций cogollos pesados, является дополнением к пропорционарному сопротивлению, действующему в лас-рамасе, для того, чтобы помочь вам в этом.

¿Dónde usar 1 Component Oil Grow?

Особое оформление для культурных растений на земле или в месклах турб, растений с использованием растений внутри и снаружи.Eficaz en cultivos de semillas tanto feminizadas como auto florecientes.

Modo de empleo 1 Component Oil Grow

Existen ciertos parámetros en los cultivos que hay que tomar en cuenta a la hora de aplicar este abono a las plantas, que son el nivel de pH que debe ser ajustado a 6.0 y el EC debe estar entre 1.6 y 2.4.

• Emplear durante toda la fase de crecimiento y en las 2 primeras semanas de floración.
• Se Recomienda colocar la cantidad Requerida hasta llegar a 0,8 Ms — 1 Ms de EC en la fase de crecimiento, toma en cuenta que si empleas Estimulador de raíces debes agreementgarlo inicialmente.
• El Estimulador en la dosis que toque de ml / L y posteriormente el 1 Component Soil Grow hasta alcanzar el electric conductividad recomendada.

Dosis 1 Component Oil Grow

En la etapa de crecimiento puedes comenzar con 3,5 мл por cada litro de agua, el cual puedes ir aumentando en base a las necesidades de tu cultivo, no debes exceder los 5 ml en la etapa de floración.

Dato 1 Component Oil Grow

Para lograr resultados altamente efectivos puedes combinar el 1 Component Oil Grow with BAC Rootstimulator y lograras un crecimiento increíble en tus plantas de cannabis.Siempre considerando medir correctiveamente los niveles de EC para colocar las dosis en la proporción recomendada y en función del Requerimiento de tu cultivo.

Especificaciones 1 Component Oil Grow

• Тип: Abono para favorecer el crecimiento.
• Origen del abono: Mineral .
• Состав: NPK 17-22-24
• Нитрогено 17%.
• Фосфоро 22%.
• Potasio 24%.

Состав почвы | Национальное географическое общество

Почва содержит воздух, воду и минералы, а также растительные и животные вещества, как живые, так и мертвые. Эти компоненты почвы делятся на две категории. К первой категории относятся биотические факторы — все живые и некогда живые существа в почве, такие как растения и насекомые. Вторая категория состоит из абиотических факторов, которые включают все неживые предметы, например минералы, воду и воздух. Самыми распространенными минералами, которые поддерживают рост растений в почве, являются фосфор и калий, а также газообразный азот. Другие, менее распространенные минералы включают кальций, магний и серу. Биотические и абиотические факторы почвы составляют ее состав.

Состав почвы — это смесь почвенных ингредиентов, которые варьируются от места к месту. Служба охраны природных ресурсов (NRCS), входящая в состав Министерства сельского хозяйства США, составила почвенные карты и данные для 95 процентов территории Соединенных Штатов. NRCS обнаружила, что в каждом штате есть «государственная почва» с уникальным «рецептом» почвы, характерным для этого штата. Эти разные почвы являются причиной того, что в Соединенных Штатах выращивают такое большое разнообразие сельскохозяйственных культур.

Рассмотрим почвы трех штатов: Гавайи, Айова и Мэн.Глубокая, хорошо дренированная почва Гавайев содержит вулканический пепел, что делает ее идеальной для выращивания сахарного тростника, а также корней имбиря, папайи и орехов макадамия. В штате Айова, который находится на Среднем Западе США, есть государственные почвы, которые подходят для сельского хозяйства, поскольку они состоят из толстого слоя органических веществ, образовавшихся в результате разложения степных трав. Кукуруза и соя — основные культуры, выращиваемые на этих почвах. Государственная земля штата Мэн, расположенная в северо-восточной части страны, сделана из материалов, оставшихся после таяния местных ледников.Эта почва идеально подходит для выращивания деревьев, в частности красной ели и бальзамической пихты. Многие деревья, выращиваемые сегодня в штате Мэн, заготавливают для производства древесины или изготовления бумаги.

Ученые-почвоведы проводят различные тесты на почвах, чтобы узнать об их составе. Тестирование почвы может определить количество биотических и абиотических факторов в почве. Результаты этих тестов также могут показать, не слишком ли много в почве определенного минерала или ей нужно больше питательных веществ для поддержки растений. Ученые также измеряют другие факторы, такие как количество воды в почве и то, как оно изменяется со временем — например, является ли почва необычно влажной или сухой? Испытания также могут определять загрязнители и тяжелые металлы в почве и определять содержание азота в почве и уровень pH (кислотность или щелочность).Все эти измерения можно использовать для определения здоровья почвы.

1. Почвы и питательные вещества для растений

Эта глава учит людей:

1. Определите физические свойства почвы и опишите, как они влияют на пригодность почвы для выращивания растений.
2. Опишите органические вещества и способы их использования для улучшения почвы.
3. Объясните, как собрать образец почвы и как использовать отчет об испытании почвы.
4. Для каждого из шести макроэлементов опишите симптомы дефицита или избытка.
5. Определить стратегии по снижению воздействия удобрений на качество воды.
6. Определите разнообразие жителей почвы, их преимущества и стратегии по укреплению их здоровья.

Почва — это живая, дышащая, естественная сущность, состоящая из твердых тел, жидкостей и газов. Почва выполняет пять основных функций:

1. Обеспечивает среду обитания для организмов
2. Перерабатывает отходы
3. Фильтры для воды
4. Служит конструкционным материалом
5. Обеспечивает среду для роста растений ¹

Мы сосредоточимся на пятой функции.В этой роли почва обеспечивает структурную стабильность для растений и удерживает и отводит воду и питательные вещества, необходимые для роста растений.

Идеальная почва для роста растений содержит 50% пор и твердых частиц, при этом поровое пространство заполнено равными частями воздуха и воды. Такое распределение происходит редко, потому что поровое пространство зависит от текстуры почвы и управления почвой. Например, обработка почвы увеличивает поровое пространство, а плохой дренаж и уплотнение уменьшают его.

Твердые вещества почвы представляют собой смесь минеральных материалов и органических веществ .Минеральные материалы обычно представляют собой выветрившуюся породу разного размера, называемую песком, илом и глиной. Органическое вещество состоит из разлагающихся остатков растений и микробов. Относительные количества порового пространства, минерального и органического вещества сильно различаются в зависимости от типа почвы. Но для роста растений большинство почвоведов согласны с тем, что 50% порового пространства, 45% минеральных веществ и 5% органических веществ составляют идеальное соотношение (рис.

Даже небольшое количество органического вещества может сильно повлиять на физические, химические и биологические свойства почвы.

¹ Brady, N.C. и R.R. Weil. 2004. Элементы природы и свойств почв, 2-е издание. Атланта, Джорджия: Prentice Hall

Рис. 1–1a.Распределение твердых частиц и порового пространства в идеальной почве.

Рисунок 1–1b. Распределение твердых частиц и порового пространства в уплотненном грунте.

Большинство естественных, нетронутых почв состоит из трех отдельных слоев переменной толщины. Слои — это верхний слой почвы, подпочва и материнский материал .Каждый слой может иметь два или более подслоя, называемых горизонтами . В совокупности горизонты составляют почвенный профиль. Преобладающий исходный материал зависит от региона Северной Каролины. В предгорьях и горах Северной Каролины материнский материал обычно представляет собой выветренную коренную породу, известную как сапролит. В днищах рек и на террасах ручьев предгорий и гор Северной Каролины материнскими материалами являются пойменные отложения, доставленные из верховьев рек, где произошла эрозия. На прибрежной равнине Северной Каролины материнскими веществами являются морские отложения, отложившиеся в течение эонов по мере того, как океаны проходят естественные циклы наступления и отступления.На самой восточной прибрежной равнине Северной Каролины преобладающим материнским материалом является органическое вещество. Эти органические почвы обычно встречаются в районах, которые всего 50 000 лет назад находились ниже уровня моря. Это болота, где растут и процветают растения. Но эти участки слишком влажные, чтобы остатки растений (листья, ветви, корни, стволы и т. Д.) Могли эффективно разложиться.

Свойства почв меняются в зависимости от глубины почвы. Поверхность почвы или верхний слой почвы (горизонт O и A на рис.

Подземный слой (горизонты B и C на Рисунке 1-2), известный как подпочва, обычно имеет более высокое содержание глины и более низкое содержание органических веществ, чем верхний слой почвы.

Свойства почвы часто ограничивают глубину, на которую могут проникать корни растений. Например, корни не прорастут через непроницаемый слой. Этот слой может быть скальной породой (рис. 1–3), уплотненной почвой или химическим барьером, например кислым (очень низким) pH .Высокий уровень грунтовых вод также может ограничить рост корней из-за плохой аэрации почвы. Немногие большие деревья растут на мелкой почве, потому что большие деревья не могут развить достаточно сильную корневую систему, чтобы предотвратить их опрокидывание. Мелкие почвы также более подвержены засухе, потому что они содержат меньше воды и, следовательно, высыхают быстрее, чем более глубокие почвы.

Почвы меняются в трех измерениях. Первое измерение идет сверху вниз по профилю почвы. Два других измерения — с севера на юг и с востока на запад. Практическое значение этой трехмерной изменчивости состоит в том, что когда вы перемещаетесь по штату, округу или даже полю, почвы меняются. Это изменение объясняется пятью факторами почвообразования:

1. Основной материал
2. Биологическая активность
3. Климат
4. Топография
5. Время

Различие даже в одном из этих факторов приведет к другому типу почвы.Почвы, сформированные из разных почвенных материалов, различаются. Почвы, сформированные из одного и того же материнского материала в разных климатических условиях, различаются. Почвы на вершине холма отличаются от почв внизу. Вершина холма теряет материал из-за естественной эрозии; нижняя часть получает материал сверху. Учитывая количество возможных комбинаций этих пяти факторов, неудивительно, что в настоящее время в Северной Каролине нанесено на карту более 450 уникальных серий почв. В мире насчитывается более 20 000 различных серий почв.Ряды почвы на уровне микрорайона можно найти, набрав «Web Soil Survey» в любой поисковой системе в Интернете.

Джон А. Келли, USDA-Служба охраны природных ресурсов

Джон А. Келли, Служба охраны природных ресурсов Министерства сельского хозяйства США

Рисунок 1–3. Серия грунтов Craggey; пример неглубокой почвы.

Джон А. Келли, USDA-Служба охраны природных ресурсов

Джон А. Келли, Служба охраны природных ресурсов Министерства сельского хозяйства США

Физические свойства почвы — это характеристики, которые можно увидеть, почувствовать или измерить.К ним относятся цвет, текстура, структура и водоудерживающая способность. Такие свойства обычно определяют пригодность почвы в качестве питательной среды. Некоторые физические свойства, такие как текстура, экономически нецелесообразно изменять в больших масштабах.

Плодородие почвы, которое является химическим свойством, изменить легче, чем физические свойства почвы.

Органические вещества, присутствующие в почве минералы и условия дренажа влияют на цвет почвы. Сам по себе цвет не является показателем качества почвы, но цвет дает подсказку об определенных условиях.Например, светлые или бледные цвета зернистого верхнего слоя почвы часто связаны с низким содержанием органических веществ, высоким содержанием песка и чрезмерным выщелачиванием. Темный цвет почвы может быть результатом плохого дренажа или высокого содержания органических веществ. Оттенки красного указывают на то, что глинистая почва хорошо аэрирована, а оттенки серого указывают на недостаточный дренаж (рис. 1–4). В хорошо дренированных почвах гор Северной Каролины и Пьемонта цвета подпочвы часто имеют оттенки красного, коричневого и желтого. В слабо дренированных почвах подпочва имеет более серый цвет. Цвет

Текстура

Текстура почвы, которая относится к пропорциям песка, ила и глины, влияет почти на все аспекты использования почвы и управления ею. Песок — самая большая частица (от 2,0 до 0,05 мм), ил намного меньше (0,05-0,002 мм), а глина — самая мелкая (менее 0,002 мм) (рис. 1–5). Чтобы сравнить размеры частиц, представьте, что песчинка размером с баскетбольный мяч. В таком масштабе частица ила была бы размером с мрамор, а частица глины была бы острым предметом.От того, насколько мелкой (глинистой) или крупной (песчаной) будет почва, будут зависеть многие ее физические и химические свойства.

В значительной степени способность частиц почвы реагировать с водой и питательными веществами зависит от доступной площади поверхности (Таблица 1 – 1). Когда размер отдельных частиц невелик, больше отдельных частиц умещается в данном пространстве и, таким образом, делает доступной большую площадь поверхности. Глина с ее крошечными частицами и пластинчатой ​​структурой эффективно удерживает воду и питательные вещества, в то время как песок, имеющий крупную крупнокусковую структуру, не удерживает.Частицы глины не только меньше по размеру, но и состоят из минералов, отличных от песка и ила, а структура частицы глины больше похожа на стопку бумажных тарелок, чем на песчинку (рис. 1–6).

Таблица 1 — 1. Тип частиц, количество частиц на грамм и средняя площадь поверхности на грамм.

Камни и гравий

Камни и гравий, которые являются крупными крупными материалами, можно найти во многих почвах, но они не учитываются при определении текстуры почвы. Хотя некоторые камни и гравий в почве не влияют на усвоение питательных веществ растениями, они могут затруднить копание почвы. Если сад состоит в основном из камней или гравия, почва будет иметь пониженную способность удерживать воду и питательные вещества и будет непригодна для выращивания растений. В такой ситуации проще всего будет установить грядки и завозить грунт.

Добавление органических веществ — более экономически выгодная альтернатива улучшения почвы. Добавление органических веществ не изменяет структуру почвы — процентное содержание песка, ила и глины в почве, — но добавление органических веществ изменяет структуру почвы за счет увеличения порового пространства и улучшения дренажа.Садовники могут добиться успеха с любой структурой почвы, если они знают свойства и ограничения этой почвы. Относительные пропорции песка, ила и глины определяют текстурный класс почвы (рис. 1–7). Например, почва, состоящая из 12% песка, 55% глины и 33% ила, относится к классу текстуры глины. Текстура почвы — это постоянная характеристика, которую нелегко изменить в результате деятельности человека. Рассмотрим типичную минеральную почву глубиной 6 дюймов на 1 акре. Эта почва весит около 2 миллионов фунтов. Чтобы изменить содержание песка всего на 1%, потребуется добавить 20 000 фунтов (или 10 тонн) песка.Изменение содержания песка на 1% будет иметь минимальный эффект. Значительный эффект может потребовать изменения на 10%, что означает добавление 100 тонн песка.

Обычно для определения текстуры почвы используются лабораторные процедуры. Однако можно использовать процедуру, описанную на рис. 1–8, для определения класса текстуры методом « feel ». Это требует практики и калибровки, но может дать разумную оценку текстуры почвы.

Песчаные или крупнозернистые почвы (рис. 1–9)

• Низкое содержание органических веществ и естественное плодородие.
• Быстро проницаемый и не удерживающий влагу почвы.
• Выщелачивание питательных веществ вызывает беспокойство, поэтому правильное внесение удобрений является обязательным. Применяйте меньшее количество питательных веществ и применяйте их чаще.
• Низкое содержание катионита и буферная емкость .
• Хорошо подходит для фундаментов дорог и строительных площадок.
• Почувствуйте себя песчаным.

Суглинистые или среднетекстурированные почвы (рис. 1–10)

• Содержит больше органических веществ.
• Позволяют замедлить движение воды и лучше удерживать влагу и питательные вещества.
• Обычно более плодовиты.
• Обладают более высокой катионообменной и буферной емкостью.
• На ощупь рассыпчатый.

Глинистые или мелкозернистые почвы (рис. 1–11)

• Повышенная удерживающая способность.
• Более высокая водоудерживающая способность.
• Мелкозернистые почвы проявляют свойства, с которыми трудно справиться или преодолеть их.
• Часто бывает слишком липким в мокром состоянии и слишком твердым в сухом для выращивания.
• Может иметь характеристики усадки и набухания, которые влияют на использование в строительстве.
• Почувствуйте себя скользким.

Как типы почвы влияют на садоводов?

Уплотнение. Уплотнение происходит, когда к частицам почвы прилагается давление, а воздух и вода выталкиваются из порового пространства. Крупные частицы песка кубической формы с трудом уплотняются. Частицы глины, мелкие и пластинчатые, легко выравниваются и могут уплотняться, особенно во влажном состоянии.Уплотнение препятствует движению воды, газов (воздуха) и корней. Уплотненные почвы имеют меньшую инфильтрацию, больший сток, более высокий риск эрозии и более ограниченный рост корней, чем почвы без уплотнения. Вода стекает медленно, что может увеличить вероятность заболеваний корней растений.

Эрозия. Частицы песка тяжелые, поэтому их сложно подобрать и сдвинуть под действием воды или ветра. Частицы глины липкие, поэтому их нелегко сдвинуть. Частицы илистого суглинка легкие и не липкие, поэтому эрозионные силы легко перемещают их.Эродированные почвы обычно труднее обрабатывать и имеют более низкую продуктивность, чем почвы без эрозии. Основными причинами эрозии почвы в Северной Каролине являются недостаточный растительный покров или мульчированный покров, а также неправильное оборудование и методы, используемые для подготовки и обработки почвы (рис. 1–12).

Эрозию почвы можно свести к минимуму, приняв ряд профилактических мер:

• Выбирайте растения, подходящие к почве, чтобы они хорошо прижились.
• Ежегодно мульчируйте поверхность органическими материалами на глубину от 1 до 3 дюймов.
• Достаточно удобряйте, чтобы способствовать энергичному, но не чрезмерному росту растений.
• Создайте водозабор, например, водный путь из травы, чтобы уловить и замедлить движение воды.
• Выровняйте ряды по контуру земли, чтобы вода, стекающая с холма, замедлялась.
• Используйте надлежащие методы обработки почвы, например, не обрабатывайте слишком влажную почву и не заделывайте ее.
• Посадить озимую покровную культуру.
• Рассмотрите возможность установки дождевых садов для сбора наносов и стоков.

Площадь поверхности. Самая активная часть частицы почвы — это площадь ее поверхности. На поверхности частицы происходит обмен питательными веществами. Частицы песка имеют небольшую площадь поверхности по сравнению с их массой, что означает, что они плохо удерживают питательные вещества. Частицы глины имеют большую площадь поверхности по сравнению с их массой, поэтому небольшое количество глины может добавить значительную площадь поверхности к почве, увеличивая способность удерживать питательные вещества.

Структура

Структура почвы означает группировку отдельных частиц почвы в более крупные куски, называемые peds или агрегатами .Структура верхнего слоя почвы обычно зернистая и напоминает крошки шоколадного печенья (рис. 1–13). Хорошая зернистая структура обеспечивает быстрое движение воздуха и воды в почве. Плохая зернистая структура уменьшает движение воздуха и воды. Хорошая структура почвы способствует широкому развитию корней; плохая структура может ограничить рост корней. Добавление достаточного количества органического вещества и обработка почвы только тогда, когда она не слишком влажная, способствует хорошей структуре верхнего слоя почвы.

Вместимость воды

Вода попадает в почву в результате атмосферных осадков или орошения.Он выходит через дренаж из почвы, испаряясь с поверхности, и через транспирацию из листьев растений. Влагоудерживающая способность — удерживание воды, проходящей через почву, — зависит от различий в пространстве пор почвы. Идеальные почвы — это полупористое пространство с равным количеством воздуха и воды, заполняющими поры. Слишком много воздуха означает, что растения увянут. Слишком много воды означает снижение жизнеспособности растений и подверженность корневой гнили, которая возникает из-за анаэробных условий.

Почвы различаются количеством крупных (макро), средних (мезо) и мелких (микро) пор.Макропоры, которые чаще встречаются в песчаных почвах, быстрее впитывают воду и быстрее дренируют, чем мезо- и микропоры. Этот быстрый сток из макропор называется «гравитационной водой», потому что более слабые силы адгезии и когезии в макропорах не могут преодолеть силу тяжести. В течение 24 часов после проливного дождя гравитационная вода достигает нижних горизонтов почвы, и почва имеет полевую емкость : мезо- и микропоры все еще полны воды, потому что их силы сцепления и сцепления сильнее силы тяжести.Вода в мезопорах доступна растениям. Но когда мезопоры теряют воду по мере высыхания почвы за счет поглощения растениями и транспирации, влажность почвы достигает точки постоянного увядания. В точке постоянного увядания микропоры все еще полны воды, но эта вода настолько плотно удерживается, что недоступна для растений. Обратите внимание, что растения могут увядать до точки постоянного увядания, если растение пропускает воду через листья быстрее, чем может забирать воду из почвы через корни. Вот почему растения могут увядать в жаркие дни, а затем восстанавливаться после захода солнца, и почему растения могут сбалансировать поглощение с транспирацией (рис. 1–14).

Как исправить уплотнение

Уплотнение является вероятной проблемой, если в этом районе недавно были строительные работы или другие транспортные средства. Для разрыхления почвы может потребоваться глубокая обработка почвы, при которой верхние слои почвы от 6 дюймов до 2 футов перемешиваются культиватором, диском или ручными инструментами. Включение органических веществ во время глубокой культивации может помочь восстановить структуру почвы за счет создания агрегатов, макропор (для дренажа) и мезопор (для воды, доступной для растений).Копка или обработка почвы, когда она влажная или чрезмерно сухая, могут разрушить структуру.

Будьте осторожны с быстрыми решениями, такими как начало работы с грузовиком верхнего слоя почвы. К сожалению, нет стандартов на материал, продаваемый как «верхний слой почвы». На место могут быть доставлены новые проблемы, такие как семена сорняков и болезнетворные организмы. Добавление нового верхнего слоя почвы к существующей почве также может создать проблемы с дренажом, когда вода проходит через приобретенный верхний слой почвы и достигает уплотненного слоя. Вода может скапливаться и создавать неблагоприятные условия для роста корней.

Глинистые почвы, которые имеют тенденцию удерживать чрезмерное количество воды и легко уплотняются, представляют некоторые сложные проблемы. Распространенные ошибки — добавление песка или торфяного мха для улучшения дренажа. Добавление песка в глину уменьшит структуру почвы, уменьшив поровое пространство. Добавление торфяного мха увеличит высокую влагоудерживающую способность глинистой почвы. Лучший совет — добавлять меньшее количество органического вещества каждый год, минимизировать уплотнение и позволить биологии почвы естественным образом улучшить структуру с течением времени.

Городские почвы

По мере того, как движение за местные продукты питания набирает обороты, все больше людей занимаются садоводством в городских районах. Городские почвы могут содержать такие загрязнители, как свинец, остатки пестицидов или нефтепродукты. Перед садоводством и особенно перед тем, как производить какие-либо продукты питания на городской почве, важно понимать историю земли и правильно определять любые возможные загрязнители. S oilFacts: Минимизация рисков загрязнения почвы в городских садах (номер публикации NC State Extension AG-439-78) предоставляет подробную информацию об уровнях риска для отдельных загрязнений почвы, методах восстановления и ресурсах для профессионалов, которые могут помочь с анализом и консультациями.

Вот несколько советов по садоводству на загрязненных почвах:

Дизайн сада:

Сажайте декоративные растения на загрязненных территориях и размещайте съедобные продукты как можно дальше от загрязнителей.

Не сажайте возле дорог или зданий.

Рассмотрите возможность использования приподнятых грядок с привозной почвой (рис. 1–15).

Управление почвами:

Повышение pH почвы может помочь замедлить поглощение некоторыми загрязнителями растениями.

Органические вещества, такие как компост, могут связывать некоторые загрязнители в почве.

Если необходимо крупномасштабное восстановление, обратитесь к профессионалу за помощью при выемке грунта, промывке или удалении паров.

Рекомендации по посадке:

Избегайте корнеплодов, съедобные части которых контактируют с почвой.

Побеги и листовые культуры (салат, капуста, брокколи, сельдерей, ревень) будут иметь меньший риск заражения.

Плодовые культуры (помидоры, кабачки, фасоль, перец) будут иметь наименьший риск заражения.

Гигиена сада:

Надевайте перчатки и мойте руки и одежду после работы в саду.

Не носите в доме садовую обувь.

Внимательно следите за детьми, чтобы не попала грязь.

Вымойте продукты в мягком моющем средстве, удалите первые листья листовых культур (самые близкие к земле) и очистите корнеплоды.

Рисунок 1–4.Цвет как индикатор дренажа. Почва слева представлена ​​серией Сесил, хорошо дренированной минеральной почвой, типичной для предгорий Северной Каролины. Почва справа — это серия Coxville, плохо дренированная минеральная почва, обнаруженная на прибрежной равнине Северной Каролины.

Джон А. Келли, USDA-Служба охраны природных ресурсов

Джон А. Келли, Служба охраны природных ресурсов Министерства сельского хозяйства США

Рисунок 1–5. Относительные размеры песка, ила и глины.

Рисунок 1–6. Изображение слева показывает крупный план частиц песка, которые кажутся зернистыми, если смотреть невооруженным глазом. Справа показана пластинчатая текстура глины, видимая только под микроскопом.

Рисунок 1–7.Пирамидальная диаграмма, показывающая типы почвы, основана на процентном содержании глины, песка и ила.

Рисунок 1–8. Метод Feel для определения текстурного класса почв.

Рисунок 1–9. Песчаные почвы малоплодородны и не удерживают почвенную влагу.

USDA, NRCS CC BY-SA — 4.0

Рисунок 1–10.Суглинистые почвы кажутся рассыпчатыми и обычно темнее, потому что содержат органические вещества.

USDA, NRCS CC BY-SA — 4.0

Рисунок 1–11. Глинистые почвы липкие во влажном состоянии и очень твердые в сухом.

Почвоведение, штат Северная Каролина CC BY — 2.0

Рисунок 1–12.Почва на этом холме подверглась эрозии из-за стока и отсутствия растительности.

Джон А. Келли, USDA-Служба охраны природных ресурсов CC BY — 2.0

Рисунок 1–13. Примеры зернистой структуры почвы (похожей на крошки шоколадного печенья) в верхнем слое почвы.

Джон А. Келли, USDA-Служба охраны природных ресурсов

Джон А.Келли, Служба охраны природных ресурсов Министерства сельского хозяйства США

Рисунок 1–14. Растения могут увядать в жаркую часть дня, но восстанавливаются после захода солнца.Растения могут уравновесить водопоглощение и потерю воды через транспирацию.

Скот Нельсон, Flickr CC BY — 2.0

Рисунок 1–15.Садоводство в городских условиях требует тщательного учета почвенных условий. Если присутствуют загрязненные или плохо дренированные почвы, могут понадобиться приподнятые грядки.

Дэвид Крамми, Flickr CC BY — 2. 0

Органическое вещество состоит из остатков растений и животных и придает почве цвет от серого до очень темно-коричневого.Органическое вещество является домом для многих почвенных организмов.

Дождевые черви, насекомые, бактерии, грибки и животные используют органические вещества в качестве пищи, расщепляя их для получения энергии и необходимых питательных веществ. Гумус — это часть органического вещества, которая остается после разложения в большей степени (рис. 1–16).

При разложении органического вещества в почве выделяется углекислый газ, который замещает часть кислорода в порах почвы. Двуокись углерода растворяется водой в почве с образованием слабой кислоты. Этот раствор вступает в реакцию с минералами почвы, высвобождая питательные вещества, которые могут усваиваться растениями. Перевариваемые и разлагающиеся органические вещества также помогают наладить хорошие отношения воздуха и воды. В песчаной почве органический материал занимает часть пространства между песчинками. Это связывает их вместе и увеличивает водоудерживающую способность. В мелкозернистой или глинистой почве органический материал образует агрегаты из частиц почвы. Это позволяет воде быстрее перемещаться вокруг частиц почвы.

Количество органического вещества в почве зависит в первую очередь от количества осадков, температуры воздуха, видов растений, которые росли в почве, методов управления, температуры почвы и дренажа.Часто обрабатываемые почвы обычно содержат мало органических веществ, потому что обработка почвы уменьшает размер частиц остатков и увеличивает количество воздуха в почве, увеличивая скорость разложения органических веществ. Плохо дренированные почвы, как правило, имеют высокий процент органического вещества, потому что низкий уровень кислорода ограничивает разложение организмов. Чтобы накапливать органические вещества в садовой почве, обрабатывать компост при создании сада, но не обрабатывайте его в последующие годы. Вместо этого ежегодно наносите на поверхность почвы тонкие слои (от 1 до 3 дюймов) органической мульчи или компоста (рис. 1–17).Этот материал разрушится, и уровень органических веществ в почве будет постепенно увеличиваться.

Улучшение почвы

Хорошая аэрация и дренаж, а также способность удерживать достаточное количество влаги и питательных веществ — ключевые компоненты идеальной почвенной среды. Несмотря на то, что рецептов создания этой идеальной среды не существует, есть несколько наиболее важных стратегий улучшения качества почвы:

• Сведите к минимуму уплотнение почвы (не ходите по грядкам и не работайте с влажной почвой) (Рисунок 1–18).
• Уменьшает проблемы с дренажем.
• Уменьшает эрозию.
• Посадите покровную культуру (Рисунок 1–19).
• Включая органические вещества.
• Нанесите на поверхность почвы слой органической мульчи толщиной от 1 до 3 дюймов.

Органические добавки могут улучшать почвы, страдающие от сильного уплотнения, плохого дренажа и эрозии. Такие материалы, как компост, навоз и сосновая кора, более эффективны и экономичны, чем вермикулит, торфяной мох, песок, верхний слой почвы или перлит.В таблице 1-2 приведены количества добавляемого в почву органического материала на 100 квадратных футов. При работе на небольших участках общее практическое правило заключается в том, чтобы заделать в почву слой органического материала толщиной от 3 до 6 дюймов. Прежде чем растения смогут использовать питательные вещества, необходимо разложить органические вещества. Скорость разложения органического вещества почвенными организмами зависит от влажности, температуры, размера частиц, отношения углерода к азоту и наличия азота. Для быстрого разложения необходим правильный баланс углерода и азота, а также высокие температуры и достаточная влажность. При использовании соломы, листьев или опилок (с высоким содержанием углерода) добавляйте азотные удобрения, пока материал разлагается. Почвенные микробы используют азот во время разложения и могут лишать растения, что приводит к замедлению или задержке роста растений. Внесение органических веществ за несколько месяцев до посадки сада позволяет материалу разложиться и иметь доступные для растений питательные вещества для хорошего роста растений.

Таблица 1-2. Органические материалы и нормы их применения.

Включение поправок к почвам

Для кондиционирования почвы необходимо увеличить содержание органических веществ до 25% по объему. Добавление минимум 2 дюймов материала в верхние 6 дюймов почвы создаст приблизительно 8 дюймов измененной почвы. Эти дополнения поднимают грядку, улучшая дренаж и делая растения более заметными. Включение более 50% органических веществ может отрицательно повлиять на рост растений. Будьте осторожны при использовании органического материала, убедитесь, что он полностью компостирован, а не просто выдержан. Микробы, привлеченные частично разложившимися материалами, будут конкурировать с растениями за питательные вещества, особенно азот и серу, что приведет к дефициту питательных веществ и плохому росту растений.

Лучшими добавками органических веществ для глинистых почв являются сосновая кора (менее ¹ ⁄ ₂ дюймов в диаметре) и компостная листовая плесень. Следующие поправки не рекомендуются, поскольку они недостаточно улучшают физические свойства глинистой почвы: торфяной мох, песок, кора твердых пород, древесная щепа и сосновая солома.

Для песчаных почв добавление органических веществ, таких как сосновая кора или компост, улучшит удержание воды.

Рисунок 1–16.Гумус — это органическое вещество, остающееся после разложения.

Guitarclass, Flickr CC BY-NC-SA — 4.0

Рисунок 1–17.Мульчирование слоем органического материала толщиной 1–3 дюйма поможет наладить хорошие воздушные и водные отношения в почве, а также добавит питательные вещества для поглощения растениями.

Кэтлин Мур CC BY — 2.0

Рисунок 1–18.Во избежание уплотнения в огороде уложена решетка из переработанного пластика, по которой можно ходить.

Сэм Сондерс, Flickr CC BY-SA — 4.0

Оценка сообщества и динамики почвенных бактерий с помощью интегрированного высокопроизводительного количественного определения абсолютной численности [PeerJ]

Введение

Бактерии являются важными компонентами почвенной экосистемы и играют жизненно важную роль в материальном цикле и потоке энергии в экосистеме Земли (Whitman, Coleman & Wiebe, 1998). Было подсчитано, что на Земле имеется 4–6 × 10 ³⁰ клеток прокариот и 2,6 × 10 ³⁰ в почве, которая является самой разнообразной и многочисленной клеточной формой жизни на Земле (Whitman, Coleman & Wiebe, 1998; Curtis & Sloan, 2005). Почвенные бактерии интенсивно изучаются на протяжении более ста лет на отдельных людях и в сообществах, но все еще существует более 85–99% бактерий, которые невозможно изолировать и выращивать в питательных средах (Lok, 2015). Следовательно, остается вопрос, сколько бактерий существует (абсолютное и относительное количество) и кто они (виды видов) в почве, составляющей сообщество.

За последние несколько десятилетий ученые пытались ответить на эти вопросы. Классический метод подсчета на чашках путем подсчета различных колоний на чашке был самым простым способом одновременного получения информации об абсолютном и относительном количестве почвенных бактерий, но этот метод имеет ограничение из-за низкого процента культивируемых бактерий в почве (Davey, 2011; Благодатская, Кузяков, 2013). Многие другие методы были применены для изучения абсолютной или относительной численности почвенного бактериального сообщества.Например, Brookes et al. (1985) и Вэнс, Брукс и Дженкинсон (1987) попытались оценить общую численность микробов, измерив микробную биомассу-N (MBN) и -C (MBC) в почве. С развитием молекулярной биологии и более проверенных конкретных генов-мишеней количественная ПЦР (кПЦР) также становится мощным и точным методом измерения общей или специфической абсолютной численности микробов в почве (Philippot et al., 2009).

Различные биомаркеры и молекулярные методы также оказались полезными для изучения структуры сообществ почвенных бактерий.Эти методы включают фосфолипидные жирные кислоты (PLFA), полимеразную цепную реакцию-денатурирующий гель-электрофорез в градиенте (PCR-DGGE), библиотеку клонов, флуоресценцию катализированного репортерного осаждения in situ гибридизацию (CARD-FISH), микрофлюидную qPCR и т. Д. (Li et al., 2006; Ding et al., 2011; Cai et al. , 2016; Kleyer, Tecon & Or, 2017). В частности, создание метода высокопроизводительного секвенирования открыло новую эру в микробиологии. Подтвержденный сообществом микробов-имитаторов и многочисленными исследованиями, этот метод может выявить относительную численность, а также виды видов сообщества почвенных бактерий с беспрецедентным объемом информации (Wang et al., 2007; Caporaso et al., 2012; Cai et al., 2016; Сингер и др., 2016; Tourlousse et al., 2017).

Так как метод высокопроизводительного секвенирования позволяет получить обширную информацию об относительной численности (Caporaso et al., 2012; Kozich et al., 2013; Dannemiller et al., 2014; Perst et al., 2014; Stokell, Hamp & Steck, 2016; Props et al., 2017; Zhang et al., 2017), он был объединен с методами абсолютной количественной оценки общего количества микроорганизмов для характеристики более информативных изменений микробных сообществ в нескольких исследованиях (Dannemiller et al., 2014; Perst et al., 2014; Props et al. , 2017; Zhang et al., 2017). В комбинированных методах для количественной оценки абсолютной численности микроорганизмов в целом использовались проточная цитометрия (FCM), аденозинтрифосфат (ATP), подсчет на гетеротрофных планшетах (HPC), qPCR, PLFAs и MBC. Например, Perst et al. (2014) объединили пиросеквенирование генов FCM и 16S рРНК и успешно выявили изменение бактериального сообщества в питьевой воде, которое не было обнаружено измерениями АТФ и HPC. Dannemiller et al.(2014) количественно сравнили популяции грибковых аэрозолей, объединив методы количественной ПЦР и высокопроизводительного секвенирования, которые были проверены по четырем выбранным конкретным таксонам: Alternaria alternata , Cladosporium cladosporioides , Epicoccum nigrum и Pengillium / Aspicillium виды

Недавно Zhang et al. (2017) исследовали бактериальные сообщества почвы в двух разных местах, объединив результаты АТФ, количественной ПЦР, PLFA и относительной численности метода высокопроизводительного секвенирования. Тем не менее, методы не были проверены с использованием конкретных штаммов или внутренних штаммов, как это было сделано в предыдущем исследовании Dannemiller et al. (2014). До сих пор ни одно исследование не подтвердило возможность объединения методов абсолютной количественной оценки общего количества микроорганизмов и данных высокопроизводительного секвенирования для характеристики почвенных бактериальных сообществ, что намного сложнее, чем в других средах (Whitman, Coleman & Wiebe, 1998; Smets et al. др., 2016; Tourlousse et al., 2017). Как упоминалось выше, метод кПЦР — это точный метод определения абсолютного количества генов, в то время как высокопроизводительное секвенирование является основным методом определения относительной численности сообщества бактерий.Поэтому мы предложили интегрированный высокопроизводительный метод количественного определения абсолютной численности (iHAAQ) для количественной оценки бактериальной экологии почвы путем объединения методов количественной ПЦР и высокопроизводительного секвенирования в этом исследовании.

Между тем, точность метода iHAAQ была проверена с помощью внутреннего эталонного штамма Escherichia coli O157: H7 EDL933, который можно легко классифицировать и отличить от местных почвенных бактерий. Кроме того, внутренний эталонный штамм может быть абсолютно количественно определен методом кПЦР, поскольку он содержит ген белка жгутика биосинтеза FliC ( fliC ) (Latif et al., 2014). Кроме того, метод iHAAQ был применен для характеристики изменений бактериального сообщества при биодеградации почвенного фенантрена.

Материалы и методы

Штаммы бактерий, питательная среда и химические вещества

Escherichia coli O157: штамм H7 EDL933 (ATCC 43895), агар SMAC (сорбитол МакКонки) -BCIG (5-бром-4-хлор-3-индоксил-β-D-глюкуронид) (LabM, Ланкашир, Великобритания) и среда Лурия-Бертани (LB) (Becton, Dickinson and Company, Франклин-Лейкс, штат Нью-Джерси, США), использованная здесь, была описана ранее (Wang et al., 2014). После инкубации при 37 ° C на водно-орбитальном шейкере (250 об / мин) культивированный штамм EDL933 собирали центрифугированием при 4 ° C (6000 × g в течение 10 мин) и трижды промывали стерильной деионизированной водой (Wang et al., 2014). Осадки клеток ресуспендировали в стерильной деионизированной воде для достижения концентрации клеток около 2,1 × 10 ¹¹ КОЕ / мл ^-1 (КОЕ, колониеобразующие единицы). При разбавлении стерильной деионизированной водой градиент концентрации штамма EDL933 составляет порядка 2.Готовили от 1 × 10 ¹¹ до 2,1 × 10 ⁶ КОЕ мл ^-1 и добавляли к образцам почвы.

Модель Massilia sp. Штамм WG5 (CCTCC AB 2015362) был выделен из загрязненной ПАУ почвы из провинции Цзянсу, Китай, который обладает высокой способностью разлагать фенантрен (Lou et al., 2016; Wang et al., 2016). После предварительного культивирования в среде LB штамм WG5 собирали центрифугированием при 4 ° C (6000 × g в течение 10 мин) и трижды промывали стерильной деионизированной водой.Осадки клеток затем повторно суспендировали до D _{600 нм} 1,0 (приблизительно 1,5 × 10 ⁸ КОЕ мл ^-1 ) для последующего использования.

Фенантрен (PHE; Sigma-Aldrich, Шанхай, Китай), рифампицин (Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс, США), налидиксовая кислота (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США) и другие неорганические химические вещества, использованные в этом исследовании. были чистыми для ВЭЖХ или аналитической чистоты. Экстракцию и обнаружение PHE в почве проводили методом Gu et al.(2017).

Постановка эксперимента и выделение ДНК

Почва была собрана с поверхности горизонта (0–20 см) возле сталелитейного завода в провинции Фуцзянь, Китай. В лабораторию были доставлены три композитных пробы грунта с помощью холодильников с мешками для льда. Затем почву просеивали (2 мм) и хранили при 4 ° C для использования. Химические и физические свойства почвы такие же, как и у Gu et al. (2017).

Эксперимент включал 10 обработок: контроль (обработка Cont, только почва), почва с добавлением штамма EDL933 в шести концентрациях (около 10 ⁹ , 10 ⁸ , 10 ⁷ , 10 ⁶ , 10 ⁵ и 10 ⁴ КОЕ (г сухой почвы) ^-1 , что соответствует обработкам E9, E8, E7, E6, E5 и E4), почва с добавлением PHE (100 мкг (г сухой почвы) ^-1 , обработка P), в почву добавляли PHE (100 мкг (г сухой массы почвы) ^-1 ) и штамм WG5 (приблизительно 1.00 × 10 ⁷ КОЕ (г сухой почвы) ^-1 , обработка W), и в почву добавляли ПГЭ (100 мкг (г сухой почвы) ^-1 ) и азид натрия (NaN ₃ , 0,1% масс., Обработка S). Целью добавления NaN ₃ было подавление нативной микробной активности (Wei & Pan, 2010).

В вариантах лечения E9, E8, E7, E6, E5 и E4, аликвота штамма EDL933 объемом 1,0 мл с градиентными концентрациями в порядке от 2,1 × 10 ¹¹ до 2,1 × 10 ⁶ КОЕ мл ⁻¹ , соответственно, добавляли к каждому образцу почвы (30 г замороженной сухой основы).Обработки E9, E8, E7, E6, E5, E4 и Cont были использованы для разработки метода iHAAQ, а обработки P, W и S были использованы для выявления динамики сообщества почвенных бактерий во время биодеградации PHE.

Образцы каждой обработки готовили в трех экземплярах, помещая 30 г (замороженно-сухую основу) почвы в колбу на 100 мл. Все обработанные почвы были тщательно перемешаны (два часа), и влажность почвы была доведена до 100% от емкости поля (содержание воды в почве -33 кПа) путем добавления стерильной деионизированной воды.Непосредственно из каждой колбы отбирали десять граммов (замороженно-сухую основу) почвы. Кроме того, все колбы с обработками P, W и S инкубировали в темноте при 28 ± 1 ° C и еженедельно аэрировали на чистом столе в течение 30 мин. Стерильная деионизированная вода была добавлена ​​для компенсации потери влаги в почве во время инкубации и для поддержания квазипостоянного содержания влаги в почве для образцов. После 28 дней инкубации из каждой колбы с обработками P, W и S отбирали десять граммов (в пересчете на сухое замороженное состояние) почвы для экстракции ДНК.

Все образцы почвы, собранные из колб, немедленно замораживали и хранили в морозильной камере (-80 ° C). Аликвоту образца 0,21 г (замороженно-сухая основа) на собранный образец использовали для экстракции ДНК с помощью набора для выделения ДНК MoBio PowerSoil (MoBio Laboratories, Карлсбад, Калифорния, США). Извлеченную ДНК хранили в том же морозильнике (-80 ° C) перед анализом qPCR.

Количественный анализ ПЦР

Анализы qPCR были выполнены для количественной оценки специфических генов экстрагированной ДНК с тремя повторами с использованием прибора StepOnePlus ™ Real-Time PCR System (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA).Две пары праймеров, 341F (5′-CCTACGGGAGGCAGCAG-3 ‘) и 534R (5′-ATTACCGCGGCTGCTGG-3′), 520F (5’-AYTGGGYDTAAAGNG-3 ‘) и 802RTA (5’-TACNVGGGTATC) были выбраны для определения количества копий гена 16S рРНК у бактерий в вариабельных областях V3 и V4 соответственно (Reddy et al., 2012; Guinane et al., 2013). Для измерения численности штамма EDL933 был выбран ген fliC из его хромосомы, которая имела только одну копию в геноме (Latif et al., 2014). В качестве прямого и обратного праймеров использовались 5′-GCGAAGTTAAACACCACGAC-3 ‘и 5′-ACCCGTACCAGCAGTAGATT-3’ соответственно (Jun et al., 2011).

Стандартные кривые были построены с использованием 10-кратного серийного разведения плазмиды, содержащей целевые ДНК-ПЦР-фрагменты 16S рРНК и гены fliC . Реакции qPCR на 25 мкл содержали 12,5 мкл 2 × SYBR Green qPCR SuperMix-UDG с Rox (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), 0,5 мкл каждого 10-мкМ прямого и обратного праймеров и 10,5 мкл стерильной воды, свободной от ДНК. Известное количество и образцы ДНК почвы добавляли по 1,0 мкл на реакцию. Реакцию проводили в следующих условиях термоциклера: 50 ° C в течение 2 минут × 1 цикл, 95 ° C в течение 5 минут × 1 цикл, затем 95 ° C в течение 15 секунд и 60 ° C в течение 30 секунд × 40 циклов; и, наконец, следует этап диссоциации для анализа кривой плавления.Все числа копий гена рассчитывали по стандартным кривым для 16S рРНК и генов fliC с использованием метода Δ C _t (порог цикла). Все реакции КПЦР проводили в трех экземплярах.

Высокопроизводительное секвенирование и обработка данных

Согласно методу, описанному Ma et al. (2016) каждый составной образец ДНК для секвенирования был смешан путем объединения равных объемов экстракции ДНК из трех повторов.Бактериальные сообщества обработок Cont, E9 — E4, P, W и S были амплифицированы с областью V4 праймеров (520F, 5′-AYTGGGYDTAAAGNG-3 ‘и 802R, 5′-TACNVGGGTATCTAATCC-3’), а затем секвенирование на платформе Illumina Miseq по стандартным протоколам. Контроль качества считываний необработанных данных секвенирования выполнялся с использованием программного обеспечения QIIME (версия 1.7.0) (Caporaso et al., 2010). Последовательности удалялись, если среднее качество в движущемся окне на 5 бит / с ниже Q20, длина менее 150 бит / с и неоднозначный штрих-код.Последовательности с парными концами были сплайсированы по одному и тому же индексу с перекрытием не менее 10 п.о. и без несоответствия с использованием FLASH (Magoc & Salzberg, 2011). Последовательности химеры были идентифицированы de novo и удалены с использованием UCHIME (Edgar et al., 2011).

После качественной фильтрации кластеризация последовательностей была выполнена с использованием UCLUST с 97% сходством и отсортирована как операционные таксономические единицы (OTU) (Edgar, 2010). Затем OTU были классифицированы с использованием RDP-классификатора, чтобы соответствовать версии 119 базы данных SILVA (Wang et al., 2007; Quast et al., 2013). Необработанные данные, полученные в ходе этого исследования, были депонированы в NCBI SRA (Sequence Read Archive; http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sra/) под номерами доступа SRP097773 и SRP105351.

Абсолютное количественное определение почвенных бактерий и их сообществ методом iHAAQ

Абсолютная численность каждого типа или рода в сообществе почвенных бактерий была рассчитана путем умножения общего количества бактерий (количество копий гена 16S рРНК всех бактерий из кПЦР) на соответствующую относительную численность по результатам высокопроизводительного секвенирования (рис.1). Рассчитанные абсолютные численности Escherichia — Shigella , Esch-V3 и Esch-V4 были основаны на их относительной численности и общих бактериальных количествах, измеренных по участкам V3 и V4 гена 16S рРНК, соответственно. Поскольку количество копий гена 16S рРНК варьировалось в разных геномах бактерий (Latif et al., 2014; Sun et al., 2013), семь копий гена 16S рРНК и 1 копия гена fliC в одном геноме штамма EDL993 (NZ_CP008957, NCBI: http: // www.ncbi.nlm.nih.gov) были рассмотрены в данном исследовании. Абсолютное содержание гена Escherichia — Shigella (Esch-V3 и Esch-V4) и 7 × копий гена fliC было логарифмически преобразовано перед выполнением анализа линейной регрессии.

Рисунок 1: Схема рабочего процесса метода iHAAQ и процедуры его проверки.

Линейная регрессия была выполнена с использованием Origin 2016 (OriginLab, Northampton, MA, USA), а дисперсионный анализ (ANOVA) — с помощью SPSS 20 (IBM, Armonk, США). Перед ANOVA проверяли однородность дисперсий с помощью теста Левена. Тест Тьюки на достоверную значимость различий использовался, когда дисперсии были однородными. В противном случае использовался тест Тамхана Т2. Тепловые карты и кластерный анализ были выполнены с использованием программного обеспечения R версии 3.3.1 с пакетом pheatmap (R Core Team, 2013; Колде, 2015).

Результаты

Общее количество бактерий и измерение штамма EDL933 методом кПЦР

Общие фоновые количества бактерий (число копий гена 16S рРНК) составили 3,53 × 10 ⁹ ± 1,23 × 10 ⁸ и 5,82 × 10 ⁹ ± 3,29 × 10 ⁸ копий (г сухой массы почвы) ^-1 соответственно для областей V3 и V4. Общее количество бактерий в вариантах лечения от E9 до E4 варьировалось от 7.От 00 × 10 ¹⁰ до 3,53 × 10 ⁹ и от 7,23 × 10 ¹⁰ до 5,82 × 10 ⁹ копий (г сухой массы почвы) ^-1 для регионов V3 и V4 соответственно. Общее количество бактерий в областях V3 и V4 в вариантах лечения E9 и E8 было значительно ( p <0,05) выше, чем в других вариантах лечения (рис. S1). По сравнению с фоновым общим количеством бактерий (∼10 ⁹ копий (г сухой почвы) ^-1 ) добавленный штамм EDL933 в порядке от 10 ⁴ до 10 ⁷ копий (г сухой массы почвы) ⁻¹ (таблица 1) только незначительно влияла на общее количество бактерий в вариантах лечения E4 — E7 (рис.S1).

Обнаружение и расчет добавленного внутреннего эталонного штамма EDL933 (копии (г сухой почвы) ^-1 ) в почве с помощью кПЦР (ген fliC и ген 7 × fliC ) и методом iHAAQ (Esch-V3 и Esch -V4).

После того, как копий гена fliC были умножены в семь раз (обозначены как 7 × fliC ), они оказались в том же порядке абсолютной численности Esch-V3 и Esch-V4, за исключением обработки E4 (таблица 1). Результаты ANOVA показали, что не было значимой разницы ( p > 0,05) между 7 × fliC и Esch-V4 во всех вариантах лечения, за исключением лечения E4 (таблица 1).В Обработке E4 как количество копий гена fliC , так и количество копий гена fliC 7 × были значительно ниже, чем абсолютные количества Esch-V3 и Esch-V4.